非洲猪瘟检测试剂采用间接ELISA法，在酶标板条微孔上预包被纯化的ASF抗原。在试验中，加入稀释后的待检血清，经过温育后，若样品中含有ASF病毒特异性抗体，则与包被板上的抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与检测板上的抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物；在微孔中加入TMB底物液，经酶催化形成蓝色产物，加入终止液终止反应后，用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
非洲猪瘟检测试剂的注意事项：
1、试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀，使用后放回2-8℃。
2、不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
3、底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性，使用时应该注意防护。
4、TMB（显色液）不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
5、检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中，并尽快置于2-8℃)。
6、所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
7、严格遵守操作说明可以获得好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
8、血清稀释板为一次性用品，不得重复使用；血清稀释板的最大容量为300μl/孔。
非洲猪瘟检测试剂的操作步骤：
1、取预包被的检测板（根据样品多少，可拆开分次使用），将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。同时设阴性对照1孔，阳性对照2孔，取阴性及阳性对照各100μl分别加入反应孔中，轻轻振匀孔中样品（勿溢出）。
2、盖上封板膜（可按实际需要自行裁剪），置37℃温育30分钟。
3、小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，使用工作浓度洗涤液每孔加250ul，后甩去孔内液体，以上步骤重复4-6次，最后在干净吸水纸上拍干。
4、每孔加酶标记物100μl，盖上封板膜，置37℃温育30分钟。
5、小心揭开封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗涤4-6次,方法同3。切记最后在干净吸水纸上拍干。
6、每孔加显色液100µl，轻微震荡混匀、盖上封板膜37℃闭光显色15分钟。
7、每孔加终止液50μl，使反应终止，10分钟内测定结果。
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